Сравнительное действие токоферола и Эноанта на свободнорадикальное окисление при остром асептическом перитоните

Сравнительное действие токоферола и Эноанта на свободнорадикальное окисление при остром асептическом перитоните

УДК 663.253.41:547.631.4:613.292:613.26 .г

©Кутовой В.А., Медведева Е.П., Ю.А.Огай, 2004 „/^

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ДЕЙСТВИЕ ТОКОФЕРОЛА И «ЭНОАНТА» НА

СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ПРИ ОСТРОМ

АСЕПТИЧЕСКОМ ПЕРИТОНИТЕ

Кутовой В.А., Медведева Е.П., Ю.А.Огай

Национальный научный центр Харьковский физико-технический институт, г. Харьков, Институт винограда и вина "Магарач", Ялта

COMPARATIVE ACTION OF TOCOPHEROL AND ENOANT ON THE FREE-RADICAL OXIDATION AT ACUTE

ASEPTIC PERITONITIS

V.A. Kutovoy, E.P. Medvedeva,*Yu.A. Ogay . ,.. .. ..

SUMMARY

The method of chemo-luminescence was used for measurement of kinetic characteristics of intensity of a luminescence of serum and belly exudates at sharp aseptic peritonitis in animals after introduction of vitamin E and of food concentrate of grapes polyphenols "Enoant". It was established, that introduction of vitamin E and "Enoant" reduces intensity of peroxide oxidation and strengthens action of the organism antioxidant system.

Key words: chemo-luminescence, vitamin E, food concentrate of grapes polyphenols "Enoant", sharp aseptic peritonitis, peroxide oxidation




ВВЕДЕНИЕ

Известны литературные данные об участии сво-боднорадикального окисления липидов мембран при воспалительных процессах [3,4]. В основе развития воспалительных процессов лежит снижение содержания антиоксидантных резервов и избыточное образование перекисных соединений, регистрируемых методом биохемилюминесценции (БХЛ). Изменение кинетических параметров БХЛ как в самом очаге поражения, так и в сыворотке крови является показателем распространенности и остроты воспалительных процессов.

В работе изучалось противовоспалительное действие токоферола - известного антиоксиданта, который защищает клетку от окислительной деструкции и концентрата полифенолов винограда "ЭНОАНТА" -продукта с высоким содержанием натуральных полифенолов растительного происхождения, которые во много крат более активные антиоксиданты, чем токоферол [2]. Биологическая роль и антиоксидантные свойства токоферола дают основание рассматривать его как одно из наиболее значимых защитных веществ в условиях развития различных патологических состо-

яний, для которых особенно характерны сдвиги процессов СРО и нарушения структуры и функции липидов мембран. Учитывая, что "ЭНОАНТ" содержит комплекс полифенолов винограда, а также фосфоли-пиды, витамины и комплекс микроэлементов, он является богатым источником природных антиоксидан-тов, которые могут положительно влиять на течение различных патологических процессов [ 1 ].

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Целью работы было выявление закономерностей влияния острого асептического перитонита на процессы свободнорадикального окисления в условиях введения в организм антиоксидантов - токоферола (витамина Е) и пищевого концентрата полифенолов винограда «Эноант».

Работа выполнена в рамках проекта УНТЦ Uzb Hj.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Моделью воспаления служил острый асептический карагиненовый перитонит, вызываемый однократным введением внутрибрюшинного 5 мг карагинена в 1 мл изотонического раствора NaCl крысам-сам-



цам линии Вистар, массой (180-200г). Раствор кара-гинена готовили, растворяя порошкообразный караги-нен в изотоническом растворе NaCl до конечной концентрации 5 мг/мл с последующей стерилизацией ав-токлавированием при 121 °С в течение 15 мин и охлаждением до 40-45°С. Модель карагиненового воспаления является общепринятой моделью, как острого асептического воспаления, так и хронического асептического воспаления. Необходимость вызывания именно перитонита продиктована возможностью получения экссудата, изменения в котором будут наиболее полно отражать противовоспалительное действие изучаемых препаратов.

Для удаления активных форм кислорода перекисей липидов использовали масляный раствор альфа-токоферола ацетат (капсулы с 50% масляным раствором альфа-токоферола ацетата, ООО «Люми», Екатеринбург), который вводили в обычной дозе 50 мг/кг массы тела животных перед воспроизведением перитонита - за 30 минут, т.е. 5 раз до введения карагинена (по общепринятой методике). эноант вводили по такой же схеме, в количестве 0,05 мл в физиологическом растворе, что соответствует дозе 0,25 мл/кг массы тела животных. Контрольным животным вводили стерильную дистиллированную воду в количестве 0,3 мл внутримышечно. Для исключения влияния растворителя в группе в с препаратом токоферола животным вводили стерильное масло.

В разные сроки воспаления животных забивали декапитацией. Перитонеальный смыв получали промыванием брюшной полости 5 мл изотонического раствора NaCl в течение 1 минуты.

Интенсивность БХЛ измеряли на квантометричес-кой установке с ФЭУ-140. Для измерения БХЛ сыворотку крови или смыв брюшной полости помещали в измерительный термостатированный при 37 °С бюкс над торцом фото катода ФЭУ. Измеряли фон установки при закрытой шторке, затем интенсивность спонтанного свечения при открытой шторке. После первой минуты измерения с помощью специального канала в бюкс вводили раствор пергидроля. После добавления к исследуемому образцу раствора пергидроля наблюдается характерная кинетика свечения, которую регистрируют на самопишущем приборе и на компьютере.

Измеряли следующие параметры кинетики: амплитуду быстрой вспышки, конечное значение после 4 минут измерения, светосумму за весь период измерения.

Животные всех экспериментальных групп находились в одинаковых условиях по водному и пищевому режимам.

Проведена статистическая обработка полученных результатов, статистически достоверными считались различия данных с р < 0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Полученные данные представлены в таблице 1. Приведенные данные свидетельствуют о том, что при наличии воспалительного процесса в организме интенсивность свечения сыворотки крови и перитоне-ального экссудата характеризуется типичными изменениями в динамике. Высокая интенсивность максимума вспышки свечения позволяет использовать этот факт для хемилюминесцентной оценки уровня свобод-
















норадикальных продуктов в биологических субстратах и распространенности воспалительного процесса. Генерация квантов света происходит в результате метаболических процессов, обусловленных цепным сво-боднорадикальным окислением липопротеидных комплексов. Регулятором скорости протекания этих реакций является система природных антиоксидантов. Введение дополнительных антиоксидантных препаратов существенно повышает активность антиоксидан-тной системы и снижает выраженность воспалительного процесса.

ВЫВОДЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ Установлена достоверная связь между особенностями проявления и течения воспалительного процесса в динамике, уровнем свободнорадикального пере-кисного окисления и активностью антиоксидантов в сыворотке крови и перитонеальном экссудате.

Введение в организм животных таких мощных антиоксидантов, как токоферол и «Эноант», приводит к уменьшению выработки перекисных радикалов, о чем свидетельствуют данные интенсивности максимальной вспышки.

Введение таких ингибиторов, как токоферол и «Эноант», активно влияет на концентрацию природных актиоксидантов в липидах, в данном случае увеличивая ее, что подтверждается конечными значениями интенсивностиБХЛ. -у. '•* ¦¦:.-..

Комплексная оценка всех перечисленных показателей может быть использована для контроля адекватности проводимого лечения при воспалительных процессах.

Перспективными являются исследования эффективности сочетанного действия токоферола и «Эно-анта» на патогенез воспалительных процессов.

ЛИТЕРАТУРА

1. Бабанин А.А.,Богданов Н.Н., Богданов А.Н., Мешков, Хадж A.M. Эволюционно детерминирован ные законы и принципы функционирования живых сис тем как физиологический базис адекватности выбора, целесообразности применения эноанта в оздорови тельных целях. В: Материалы научной конференции «Биологически активные природные соединения ви нограда: применение в медицине продуктов с высо ким содержанием полифенолов винограда».- Симфе- ропольь,2003.-С.9-38

2. Биофизические и физико-химические исследо вания в витаминологии. - М., 1981.-186с.

3. Журавлев А.И., Журавлева А.И. Сверхслабое свечение и его значение в комплексной диагностике. - М: Медицина, 1975.-128с

4. Серкиз Я.И., Чеботарев Е.Е., Барабой В.А., Орел В.Э., Чеботарева ЕЕ. Хемилюминесценция кро ви в эксперименте и клинике.- Киев: Наукова думка, 1984.-184 с.