Концентрат «Эноант» показал избирательную антимикробную активность, эффективно подавляя рост Staphylococcus aureus при низкой концентрации (1.25 мг/мл), но не проявил действия против E. coli и C. albicans. Исследование также подтвердило отсутствие токсичности препарата, что делает его перспективным фитопрепаратом для лечения стафилококковых инфекций.
Е. Г. Мельниченко, М. А. Кирсанова, Ю. Л. Криворугиченко
С давних времен люди знали, что растения, применимые в пищу, не только кормят, но и лечат. Это связано с тем, что содержащиеся в лекарственных растениях действующие вещества при поступлении в организм человека оказывают влияние на его физиологию. Такие вещества называют биологически активными (БАВ). Они разнообразны по своему составу и относятся к различным классам химических соединений.
Красные вина и концентраты соединений винограда являются богатыми источниками биофлавоноидов и других полифенольных соединений.
Флавоноиды называют “натуральными биологическими модификаторами реакции” из-за их способности изменять реакцию организма на аллергены, вирусы и канцерогены. Об этом свидетельствуют их противовоспалительные, антиаллергические, антимикробные, антивирусные и антиканцерогенные свойства. Флавоноиды выполняют роль сильных антиоксидантов, обеспечивая защиту от окисления и повреждения свободными радикалами [6].
Одной из самых целебных групп растительных флавоноидов являются проантоцианидины. Они обладают широким спектром фармакологической активности. Проантоцианидины — одно из немногих веществ, проходящих гемато-энцефалический барьер, что позволяет им осуществлять антиоксидантную защиту тканей центральной нервной системы. Они обладают способностью увеличивать внутриклеточное содержание витамина С, снижать проницаемость и ломкость капилляров, поддерживать структуры коллагена и препятствовать его разрушению.
По литературным данным, экстракты, содержащие проантоцианидины, препятствуют расщеплению и синтезу веществ, участвующих в развитии воспаления и аллергических реакций, таких как гистамин, серинпротеаза, простагландины и лейкотриены [8].
Концентрат полифенолов винограда “Эноант” отличается высоким содержанием проантоцианидинов [4].
Другим биофлавоноидом, содержащимся в концентрате “Эноант”, является кверцетин. Кверцетин обладает способностью ингибировать альдозоредуктазу — фермент, преобразующий глюкозу крови в сорбит. Поэтому кверцетин значительно уменьшает накопление сорбита и замедляет агрегацию тромбоцитов [5]. Кверцетин обладает антивирусными свойствами в отношении вируса простого герпеса I, парагриппа 3 типа, полиовируса I типа, респираторно-синцитиального вируса [7].
Из фенольных соединений не флавоноидной природы “Эноант” содержит производные ряда фруктовых кислот, играющих важную физиологическую роль. Одним из свойств производных оксикоричных кислот является их антимикробная активность [1].
По литературным данным, полифенольные соединения винограда, а также их концентраты, при высокой физиологической активности и биодоступности, не обладают токсичностью [5].
Таблица 1
Антимикробное действие концентрата “Эноант” на стандартные музейные штаммы микроорганизмов
| Микроорганизмы | Количественная величина, МДС ≤5,0 мг/мл |
|---|---|
| C. Albicans | — |
| E. coli | — |
| St. Aureus | 1,25 мг/дм³ |
МДС — минимальное действующее содержание полифенолов винограда.
Цель данной работы заключалась в том, чтобы определить, какое влияние оказывает концентрат “Эноант” на тестовые штаммы микроорганизмов.
В задачи работы входило:
- провести исследования чувствительности микроорганизмов E. coli, S. Aureus и C. Albicans к пищевому концентрату “Эноант” и определить в нем минимальное действующее содержание суммарных полифенолов винограда;
- определить влияние концентрата “Эноант” на биолюминесцентную систему фотобактерий.
Методы исследований
Для изучения антимикробного действия использовали такое количество концентрата “Эноант”, в котором общее содержание суммарных полифенолов винограда составляло от 5 мг/мл до 0,5 мг/мл.
Исследование чувствительности штаммов микроорганизмов к концентрату “Эноант” изучали методом серийных разведений в жидких и агаризованных средах [3].
Посевная доза бактерий равнялась 10⁶–10⁹ микробных клеток на 1 мл питательной среды. Посевы инкубировали в течение 24 ч при 37°С для стафилококков и энтеробактерий и 48 ч при 28°С для кандид. Из пробирок с отсутствием видимого роста делали контрольный высев на селективные среды. Результаты оценивали по интенсивности роста бактерий на агаризованных средах.
Для определения токсичности концентрата “Эноант” использовали биолюминесцентный метод анализа по методике определения токсичности водных сред на Ph. phosphoreum [2]. Сущность метода заключалась в следующем: клетки фотобактерий с фиксированным уровнем свечения помещали в кюветы фотоэлектролюминометра, содержащие растворы 5, 10, 20 мкг/мл испытываемого вещества. Через 20 минут экспозиции регистрировали количество квантов света в пробах и контроле, сравнивали их и по изменению уровня свечения судили о токсическом воздействии веществ на клетки фотобактерий. Снижение свечения на 50% и более относительно контроля свидетельствовало о наличии у вещества токсических свойств.
Результаты и обсуждение
Исследования антимикробного действия концентрата “Эноант” относительно возбудителей бактериальных инфекций E. coli, S. Aureus и C. Albicans показали, что не все тестируемые бактерии проявляют чувствительность к действию концентрата “Эноант” (табл. 1).
При общем содержании суммарных полифенолов винограда 5 мг/мл концентрат не оказывал существенного воздействия на E. coli и C. Albicans.
Антимикробное действие концентрата “Эноант” было показано только относительно S. Aureus при полном подавлении его роста. Минимальное действующее общее содержание полифенолов винограда в концентрате “Эноант”, оказывающее бактерицидный эффект, составляло 1,25 мг/мл, что в 20 раз ниже, чем их среднее содержание в дозах, рекомендованных при клинических испытаниях. Следовательно, применение концентрата “Эноант” может оказаться целесообразным при различных стафилококковых инфекциях.
Для выполнения следующей поставленной перед нами задачи было изучено влияние концентрата “Эноант” на биолюминесцентную систему фотобактерий.
Под воздействием концентрата кривая уровня свечения изменялась параллельно с контролем. Однако уровень биолюминесценции на протяжении всего измерения был значительно выше, чем в контроле (рис. 1). Такая тенденция сохранялась во всех пробах, независимо от содержания концентрата.
Следовательно, ингибирования люминесценции концентратом относительно контроля не наблюдалось, что может свидетельствовать об отсутствии у него токсичности.
Основываясь на проделанных экспериментах и литературных данных о целебных свойствах полифенольных соединений, хочется надеяться, что концентрат “Эноант” займет достойное место среди фитопрепаратов лечебно-профилактического действия.
Литература
- Биологически активные вещества лекарственных растений / Георгиевский В. П., Комиссаренко Н. Ф., Дмитрук С. Е. — Новосибирск: Наука, 1990. — 333 с.
- Методика визначення токсичності води на бактеріях Photobacterium phosphoreum (Cohn) Ford / Крайнюкова А. М., Ульянова І. П. и др. // Керівний нормативний документ КНД 211.1.4.060-97. Київ, 1997. С. 20.
- Навашин С. М., Фомина И. П. Справочник по антибиотикам. — М.: Медицина, 1974. — С. 38–39.
- Огай Ю. А., Загоруйко В. А., Богадельников И. В. и др. Биологически активные свойства полифенолов винограда и вина // Виноградарство и виноделие. — 2000. — С. 25–26.
- Энциклопедия биологически активных добавок к пище / Орлова С. В. — М., 1998. — Т. 1. — С. 126–130.
- Havsteen B. Flavonoids, a class of natural products of high pharmacological potency // Biochem. Pharmacol. — 1983. — Vol. 32. — P. 1141–1148.
- Kaul T. N., Middleton E., Ogra P. Antiviral effect of flavonoids on human viruses // J. Med. Virol. — 1985. — Vol. 15. — P. 71–79.
- Whitehead T. P., et al. Effect of red wine ingestion on the antioxidant capacity of serum // Clin. Chem. — 1995. — Vol. 41. — P. 32–35.
